精子計(jì)數(shù)是在顯微鏡下計(jì)算一次排出的精液中精子的數(shù)量將精子計(jì)數(shù)值乘以精液量就可得出一次**的量。精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后，滴于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上，在顯微鏡下計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)內(nèi)的所有精子數(shù)并換算為每m1內(nèi)所含精子數(shù)。此外還可用電子細(xì)胞計(jì)數(shù)儀經(jīng)調(diào)整閾值設(shè)置后計(jì)數(shù)精子數(shù)量。將已經(jīng)液化的精液標(biāo)本均勻混合，用白細(xì)胞計(jì)數(shù)吸管吸精液至0.5刻度，再吸稀釋液至11刻度，振蕩三分鐘，然后置于血球計(jì)數(shù)板內(nèi)，計(jì)數(shù)二大格（每格面積1平方毫米）之精子數(shù)，在尾數(shù)后加5個(gè)“0”即得每毫升精液內(nèi)精子數(shù)。例如計(jì)數(shù)為1280個(gè)，則每毫升精子應(yīng)為128,000,000。精液稀釋液之配制：重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內(nèi)重碳酸鈉有消化粘液的作用，福爾馬林有使精子制動(dòng)的作用。如精液之稠度過(guò)高而不易吸取時(shí)，可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內(nèi)，稀釋后進(jìn)行計(jì)數(shù)。如精子的數(shù)目極少，亦可改為稀釋10倍計(jì)數(shù)。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的，還有25%是由輸精管道的其他部分來(lái)的，因此單憑一次排精的精子計(jì)數(shù)來(lái)衡量睪丸生精機(jī)能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查，才能比較正確地從這些精子計(jì)數(shù)來(lái)反映睪丸的生精機(jī)能。通過(guò)計(jì)算機(jī)圖像處理功能對(duì)顯微鏡下放大的精子圖像進(jìn)行識(shí)別和跟蹤計(jì)算，從而得出精子動(dòng)靜態(tài)各項(xiàng)參數(shù)。香港人精子分析WOB

CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學(xué)評(píng)估。CASA系統(tǒng)可用來(lái)定量分析精子頭部形態(tài)學(xué)、中段甚至主段的形態(tài)，可以把精子頭部和中段分類為正?；蛘卟徽?，還可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差和中位數(shù)，以及對(duì)染色的精子頂體區(qū)進(jìn)行測(cè)量[3]。與人工操作相比，自動(dòng)化系統(tǒng)更具客觀性，精確度和重復(fù)性的潛力[4]。精確度和重復(fù)性不低于7%[5]，這優(yōu)于有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員的手工評(píng)估。兩個(gè)研究已經(jīng)提示在CASA結(jié)果與生育力之間存在***聯(lián)系。Coetzee等發(fā)現(xiàn)自動(dòng)分析的正常精子形態(tài)的結(jié)果是預(yù)示體外受精率和妊娠率的有意義指標(biāo)[6]。Garrett等發(fā)現(xiàn)**中能與透明帶結(jié)合的、具有某些頭部形態(tài)特征的精子所占的百分比（Z%），和直線速度（VSL）的精子的百分比，與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關(guān)系。Z%和VSL與生育力間的關(guān)系顯示是連續(xù)的，而且沒(méi)有顯示臨界值；高于臨界值，妊娠率也不會(huì)進(jìn)一步增加[7]。香港人精子分析WHO第6版明確提出：使用CASA系統(tǒng)須遵循適當(dāng)?shù)某绦虿襟E，才能獲得可靠和可重復(fù)的結(jié)果。

精液顯微鏡檢查(1)精子存活率：排精后30～60分鐘，正常精子存活率應(yīng)為80%～90%，精子存活率降低是導(dǎo)致不育的重要原因。(2)精子活動(dòng)力：指精子活動(dòng)狀態(tài)，也是指活動(dòng)精子的質(zhì)量。世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦將精子活動(dòng)力分為4級(jí)：①精子活動(dòng)好，運(yùn)動(dòng)迅速，活潑有力，直線向前運(yùn)動(dòng)；②精子活動(dòng)較好，運(yùn)動(dòng)速度尚可，游動(dòng)方向不定，呈直線或非直線運(yùn)動(dòng)，帶有回旋；③精子運(yùn)動(dòng)不良，運(yùn)動(dòng)遲緩，原地打轉(zhuǎn)或抖動(dòng)，向前運(yùn)動(dòng)能力差；④死精子，精子完全不活動(dòng)。正常精子活動(dòng)力應(yīng)在③級(jí)以上，若＞40%的精子活動(dòng)不良(③、④)級(jí)，常是導(dǎo)致男性不育的重要原因。精子活動(dòng)力低，主要見(jiàn)于精索靜脈曲張、泌尿生殖系統(tǒng)非特異性***，應(yīng)用某些藥物如抗瘧藥、雄***等所致。

五、精子活動(dòng)力檢測(cè)[正常參考值]**后30-60分鐘活動(dòng)力為Ⅲ級(jí)以上的精子＞0.80：**后120分鐘內(nèi)活動(dòng)力為Ⅲ級(jí)以上的精子＞0.60；**120分鐘后0.25-0.60的精子仍能活動(dòng)。[臨床意義]活動(dòng)不良或不活動(dòng)的精子增多，是導(dǎo)致不育的重要原因之一。常見(jiàn)于精索靜脈曲張、泌尿生殖系的非特異性***如大腸桿菌***，某些代謝藥、抗瘧藥、雌***、氧化氮芥等，也可使精子活動(dòng)力下降。六、精子計(jì)數(shù)[正常參考值](100-150)×109/L或一次排精總數(shù)為(4-6)×108。[臨床意義]1．精子計(jì)數(shù)小于20×109/L或一次排精總數(shù)少于1×108為不正常，見(jiàn)于精索靜脈曲張、鉛金屬等有害工業(yè)污染、大劑量放射線及某些藥物影響。2．精液多次未查到精子為無(wú)精癥，主要見(jiàn)于睪丸生精功能低下，先天性輸精管、精囊缺陷或輸精管阻塞。輸精管結(jié)扎術(shù)2個(gè)月后精液中應(yīng)無(wú)精子，否則說(shuō)明手術(shù)失敗。3．老年人從50歲開(kāi)始精子數(shù)減少以至逐步消失。全自動(dòng)精子分析儀極大提高臨床檢驗(yàn)水平，廣泛應(yīng)用于泌尿科，男性科以及計(jì)劃生育、優(yōu)生優(yōu)育研究等。

前沿性檢查：目前不作為生育力低下男性初步評(píng)估的常規(guī)方法。這一部分包括了非常專業(yè)化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測(cè)技術(shù)。有研究認(rèn)為，氧化應(yīng)激可能是影響人類精子功能和妊娠結(jié)局的重要因素；新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質(zhì)組裝與生育力的關(guān)系。前沿性檢查一節(jié)中詳細(xì)介紹了精子氧化應(yīng)激和活性氧實(shí)驗(yàn)、精子染色質(zhì)檢測(cè)(苯胺藍(lán)和色霉素A3染色)的具體實(shí)驗(yàn)操作及討論。手冊(cè)重寫(xiě)了計(jì)算機(jī)輔助精子分析(CASA)部分，強(qiáng)調(diào)了CASA對(duì)于檢測(cè)精子濃度的局限性與質(zhì)控要求，增加了CASA檢測(cè)精子超活化運(yùn)動(dòng)的內(nèi)容。對(duì)精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的功能分析，可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此，手冊(cè)新增了檢測(cè)精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的內(nèi)容。CASA系統(tǒng)減少了人為因素對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，提高了檢測(cè)的客觀性和可重復(fù)性?。南京計(jì)算機(jī)輔助精子分析VAP

IVOS和CEROS集成了智能化的分析軟件，能夠自動(dòng)識(shí)別和計(jì)算精子的各項(xiàng)參數(shù)，減少了人工操作的誤差。香港人精子分析WOB

九、精液酸堿度(pH)檢查[正常參考值]7.2-8.0。[臨床意義]1．精液pH值＜7.0，多見(jiàn)于少精或無(wú)精癥，常反映輸精管道阻塞、先天性精囊缺如或附睪病變等。2．精液pH值＞8.0，常見(jiàn)于急性***，如精囊炎、前列腺炎等。十、男性生育力指數(shù)測(cè)定[計(jì)算公式]I=M(N×V)/（A×106）式中I為男性生育力指數(shù)；M為活動(dòng)精子百分率；N為每毫升的精子數(shù)；V為精子運(yùn)動(dòng)的速度；A為畸形精子的百分率。[正常參考值]正常人生育力指數(shù)＞l。[臨床意義]1．生育指數(shù)為0，表明完全無(wú)生育能力。2．生育指數(shù)為0-1之間，表明有不同程度的生育障礙。香港人精子分析WOB