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Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的,與MEM培養(yǎng)基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍,同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。DMEM培養(yǎng)基**初設(shè)計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。針對***的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,我們提供多種組分的DMEM改良培養(yǎng)基。高糖型培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒宿主細(xì)胞、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn),例如利用CHO細(xì)胞表達(dá)EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。不含葡萄糖的培養(yǎng)基可以根據(jù)研究需要,隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度,方便快捷。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,但其在溶液中不穩(wěn)定,會自發(fā)降解,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長。 RPMI-1640是改進(jìn)型的McCoy ‘s 5A培養(yǎng)基,使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)。醫(yī)用細(xì)胞培養(yǎng)基
DMEM 培養(yǎng)基成分復(fù)雜且精妙,除了富含氨基酸、維生素、葡萄糖、等主要成分外,還包含多種無機(jī)鹽。這些無機(jī)鹽在維持細(xì)胞內(nèi)外滲透壓平衡方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用,確保細(xì)胞不會因滲透壓異常而出現(xiàn)失水皺縮或吸水膨脹等情況,維持細(xì)胞正常形態(tài)。同時,無機(jī)鹽中的離子,如鈣離子、鎂離子等,參與細(xì)胞內(nèi)的信號傳導(dǎo)過程,影響細(xì)胞的生長、分化和代謝等生理活動,為細(xì)胞的生命活動提供穩(wěn)定的離子環(huán)境,與其他營養(yǎng)成分協(xié)同作用,共同促進(jìn)細(xì)胞的健康生長。貴州RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基源頭直供Ham’sF-10營養(yǎng)混合物(Ham’sF-10Nutrient Mixture)是由Ham針對CHO細(xì)胞無血清培養(yǎng)設(shè)計出的一種培養(yǎng)基。
培養(yǎng)液的滲透壓是一個非常重要的因素,細(xì)胞通??赡褪?60mOsm/kg~320mOsm/kg。標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動。特別注意:向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)有可能會明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓,特別是溶于強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中的物質(zhì)。向培養(yǎng)液中添加HEPES時需按以下方法調(diào)節(jié)鈉離子濃度。緩沖系統(tǒng)大多數(shù)細(xì)胞所需pH在-。但是,細(xì)胞培養(yǎng)適pH值隨培養(yǎng)的細(xì)胞種類不同而不同。成纖維細(xì)胞喜歡較高pH(-),而傳代轉(zhuǎn)化細(xì)胞系則需要偏酸pH(-)。由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉(NaHCO3)與CO2體系進(jìn)行緩沖,因此,氣相中的CO2濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2濃度設(shè)定在5%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為;如果CO2濃度維持在10%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為。細(xì)胞培養(yǎng)瓶蓋不應(yīng)擰得太緊,以保證氣體交換。HEPES是一種非離子緩沖液,在pH-范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,但是非常昂貴,在高濃度時對一些細(xì)胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉()共用,以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。在這種培養(yǎng)條件下,細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊,以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑,酸性培養(yǎng)液呈橙黃色,堿性培養(yǎng)液呈深紅色。
隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度,方便快捷。高糖型培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒宿主細(xì)胞、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn),例如利用CHO細(xì)胞表達(dá)EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。HEPES是一種優(yōu)良的生物緩沖劑,對細(xì)胞無毒性作用,添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長時間保持恒定的PH范圍,可以有效的防止培養(yǎng)液PH波動較大對細(xì)胞生長產(chǎn)生不利的影響。可用于無CO2培養(yǎng)箱。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑,用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度,在低PH值時酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,而較高的PH值時使培養(yǎng)液呈紫色,PH值~,適合細(xì)胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點(diǎn),使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會干擾流式細(xì)胞分析時候的檢測。此外,一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,青霉素能夠干擾細(xì)菌細(xì)胞壁的合成,對革蘭陽性菌特別有效;而鏈霉素能夠與細(xì)菌核糖體30S亞單位結(jié)合,抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成,對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用可以預(yù)防絕大部分的細(xì)菌污染。高糖 DMEM 適合生長快、粘附低的細(xì)胞,如腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng) 。
動物細(xì)胞培養(yǎng)(animalcellculture)就是從動物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個細(xì)胞(使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶)然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長和增殖。細(xì)胞培養(yǎng)基的種類有哪些?按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類。DMEM(Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium)是由Dulbecco在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良獲得的,各成分份量加倍,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)兩種類型。細(xì)胞生長快。附著稍差的腫瘤細(xì)胞、克隆培養(yǎng)用高糖效果較好,常用于雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)。2.神經(jīng)元基礎(chǔ)培養(yǎng)基可為神經(jīng)元生長提供基礎(chǔ)營養(yǎng)物質(zhì)。IPL-41昆蟲培養(yǎng)基(IPL-41InsectMedium)旨在用于大規(guī)模擴(kuò)增草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda)細(xì)胞系,也常用于通過桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)(BEVS)進(jìn)行蛋白表達(dá)。IPL-41培養(yǎng)基是對原始IPL配方的改良,由美國農(nóng)業(yè)部昆蟲病理實驗室Weiss等人開發(fā),用于大規(guī)模擴(kuò)增草地貪夜蛾衍生細(xì)胞系。Weiss向基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入了胎牛血清和TPB培養(yǎng)基(TryptosePhosphateBroth),成功地實現(xiàn)了IPL-21AE。MEM α 培養(yǎng)基不含核苷和脫氧核苷的MEM α培養(yǎng)基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型細(xì)胞的篩選培養(yǎng)基。北京醫(yī)用細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)廠
DMEM培養(yǎng)基**初設(shè)計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型)。醫(yī)用細(xì)胞培養(yǎng)基
1.細(xì)胞培養(yǎng)基的種類按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機(jī)鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成份,參與細(xì)胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細(xì)胞結(jié)團(tuán)。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養(yǎng);后者緩沖能力較強(qiáng),適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。天然培養(yǎng)基指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基,如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優(yōu)點(diǎn)是營養(yǎng)成分豐富,培養(yǎng)效果良好,但缺點(diǎn)是成分復(fù)雜,來源受限且制作過程復(fù)雜、批間差異大。目前使用的天然培養(yǎng)基是血清,另外各種組織提取液、促進(jìn)細(xì)胞貼壁的膠原類物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經(jīng)蛋白酶和肽酶水解的產(chǎn)物。醫(yī)用細(xì)胞培養(yǎng)基
深圳市華晨陽科技有限公司是一家集基因檢測、分子診斷、干細(xì)胞研發(fā)生產(chǎn)銷售于一體的國家高新技術(shù)企業(yè)。公司擁有20多項**,部分專利已經(jīng)轉(zhuǎn)化應(yīng)用于市場。公司于2016在深圳沙井恒昌榮高新產(chǎn)業(yè)園建立新的GMP廠房及研發(fā)實驗室。產(chǎn)品主要應(yīng)用于基因檢測、醫(yī)院、醫(yī)療機(jī)構(gòu)、生物制藥、出入境檢驗檢疫、診斷試劑、公安刑偵法醫(yī)等。近年來,公司不斷加大自主研發(fā)投入,積極引進(jìn)人才和技術(shù),并與國內(nèi)外多家科研院所以及醫(yī)院有著緊密合作,促進(jìn)產(chǎn)學(xué)研成果轉(zhuǎn)化。
公司通過中國CFDA,美國FDA,歐盟CE,以及SGS,TUV實地認(rèn)證,擁有進(jìn)出口權(quán),本著“質(zhì)量至上,求實創(chuàng)新,質(zhì)量服務(wù),合作共贏”產(chǎn)品遠(yuǎn)銷全球,并獲得廣大客戶一致認(rèn)可。
主營產(chǎn)品:一次性使用病 毒采樣管,植絨拭子,口腔拭子,咽拭子,一次性采樣拭子,細(xì)胞保存液,病 毒保存液,病 毒滅活液,唾液采集器,采樣盒,拭子套裝.尼龍植絨拭子,聚丙烯拭子