有關(guān)詳細信息,請參見表2?!癫唤ㄗh在SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng)中剝離印跡。印跡已被剝離可以從阻塞步驟開始在SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)中對遵循標準協(xié)議的系統(tǒng)進行重新探測。●如果不需要剝離(例如,如果使用其他二抗進行檢測),則可以重新檢測印跡快速清洗后,立即在SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)中使用。 優(yōu)化準則抗體已經(jīng)開發(fā)了優(yōu)化指南,以使用戶能夠轉(zhuǎn)換所用抗體的濃度將標準免疫檢測測定法濃縮至適用于SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng)的濃度。大多數(shù)用戶會能夠使用相同量的抗體,但與標準品相比,體積更小,濃度更高免疫檢測。但是,當(dāng)使用擴展抗體方案(第12頁)時,可以使用相同的方法通常用于標準免疫檢測的一抗的濃度,體積和時間,其次是較高濃度的二抗,持續(xù)時間較短。表1.如何根據(jù)SNAP i.d.9益啟生物公司帶您了解細胞跨膜電阻儀詳情。楊浦區(qū)Merck超濾杯Merck儀器批發(fā)
15分鐘。圖4.擴展孵化(過夜):SNAP i.d.8 2.0系統(tǒng)與標準免疫檢測一種。 SNAP id.o 2.0蛋白檢測b。標準系統(tǒng)Midi印跡免疫檢測將A431細胞裂解液和大鼠肝裂解液(12至3 ug)轉(zhuǎn)移至Immobilon9-P膜。兩種印跡均用在TBST中制備的0.5%NFDM封閉。這SNAP i.d.c 2.0 Midi印跡被阻斷20秒,標準印跡為分鎖了1個小時。兩種印跡均與相同稀釋度的MAP激酶1/2(ErK1 / 2),但是,對于HRP偶聯(lián)的二抗山羊抗兔(AP132P),將SNAP i.d.2.0印跡孵育10分鐘在TBST中洗滌3次后,將標準印跡孵育1小時。 圖5.擴展孵化(1小時):,SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)1小時協(xié)議與SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)標準協(xié)議與標準免靜安區(qū)Merck手持細胞計數(shù)器Merck儀器聯(lián)系電話益啟生物公司帶您了解微流控細胞芯片分析儀詳情。
P i.d.o 2.0SNAP i.d. @ 2.0多印跡框架迷你相框中框阻塞溶液量每孔15毫升30毫升30毫升抗體量每孔2.5 mL5毫升10毫升洗滌緩沖液*量每孔4x 15 mL每個4x 30 mL每個4x 30 mL●Tris或磷酸鹽緩沖鹽溶液,補充有0.1%Tweene 20表面活性劑在計算免疫檢測所需的抗體量時,三個要素對于成功檢測出蛋白質(zhì)并獲得了高質(zhì)量的印跡(低背景,高信號):●樣品類型和凝膠上樣濃度●一級和二級抗體濃度●檢測試劑的種類和靈敏度下表中的所有抗體均使用LuminataTM Forte化學(xué)發(fā)光檢測試劑進行了測試。對于SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng),抗體濃度高于標準免疫檢測中的濃度,但濃度較低體積。 表3.標準免疫檢測中一抗稀釋的實例 SNAPi.d.?2.0免疫檢
(1)消除印跡和印跡支架之間的氣泡滾動墊(1)提供光滑的表面以用于組裝印跡潤濕托盤(2)用于潤濕吸墨紙架和吸墨紙抗體收集盤(2)收集抗體以進行回收快速入門指南(未顯示)SNAP i.d.o 2.0 MultiBlot持有接受MultiBlot支架進行印跡孵育SNAP2FRMB01框架和蓋子SNAP ID。@ 2.0迷你印跡保存接受Mini吸盤架進行吸盤孵育SNAP2FRM***框架和蓋子SNAP2FRMNO2SNAP i.d. @ 2.0 Midi印跡控股接受Midi印跡支架進行印跡孵育SNAP2FRMD01框架和蓋子SNAP2FRMD02SNAP i.d.o 2.0 MultiBlot固定器接受多達4.5倍8.4厘米的污點SNAP2BHMB050(包括2個MultiBlot孔空白)只在運行上海益啟生物的微流控細胞芯片分析儀詢價公司電話。
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