病理實驗外包常見染色介紹MASSON染色:masson染色是指用兩種或三種陰離子染料混合,膠原纖維呈藍色,肌纖維呈紅色。用來顯示組織中纖維以及炎性因子的染色方法之一。Masson染色是顯示膠原纖維分布的經(jīng)典染色方法,利用染色的兩種不同分子量的陰離子在組織滲透性的差異,根據(jù)不同的滲透性能差異,區(qū)分出不同的組織成分。經(jīng)Masson染色后,膠原纖維呈現(xiàn)藍色,肌纖維紅色,細胞核藍黑色。Masson染色可用作心梗模型、肺纖維化、肝纖維化以及腎纖維化模型的定性與膠原纖維沉積的半定量分析。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。病理實驗外包檢測,公司自有實驗室,歡迎考察。陜西哪家做病理實驗外包
病理實驗外包,病理染色多聚甲醛保存組織的注意事項:多聚甲醛放置過久其中的醛基可能會被氧化為酸,使溶液pH降低,從而影響染色。不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。多聚甲醛雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過24小時。多聚甲醛可長期存在于固定過的細胞或組織樣品中,固定完成后用適當(dāng)?shù)南礈煲夯蛩疀_洗數(shù)小時仍會有殘留,因此后續(xù)實驗結(jié)果如果受醛基影響,須盡量洗去殘留的多聚甲醛。醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%多聚甲醛固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。陜西哪家做病理實驗外包電鏡檢測,病理實驗外包選南京英瀚斯。
病理實驗外包,病理染色常見染色介紹油紅O染色:油紅O脂肪染色法是指在日常病理診斷和科研工作中為了顯示組織內(nèi)的脂肪常采用油紅O進行染色的方法,油紅O為脂溶性染料,在脂肪內(nèi)能高度溶解,可特異性的使組織內(nèi)甘油三酯等中性脂肪著色。肝細胞內(nèi)的脂肪滴呈紅色,細胞核呈藍色1.標本人或動物的肝組織等,甲醛—鈣液固定,冰凍切片,厚10μm。2.改良的油紅O染色液油紅O0.5g,50%乙醇100ml。將油紅O溶于乙醇內(nèi),且不斷攪拌至完全溶解即可。配制好的染液置磨口瓶內(nèi)保存?zhèn)溆谩?.染色步驟①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油紅O乙醇染液作用8min;③50%乙醇分化,自來水終止分化;④蘇木素復(fù)染核,自來水返藍,甘油明膠封片。
病理實驗外包,病理染色常見染色介紹TUNEL染色:基因組DNA斷裂時,暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TerminalDeoxynucleotidylTransferase,TdT)的催化下加上熒光素(FITC)標記的dUTP(fluorescein-dUTP),從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測,這就是TUNEL(TdT-mediateddUTPNick-EndLabeling)法檢測細胞凋亡的原理。實驗步驟使細胞或組織貼在載玻片上?固定?洗滌?通透?洗滌?預(yù)平衡?用熒光素12-dUTP標記斷裂的DNA鏈?終止反應(yīng)?洗滌?封片?分析樣品南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。病理實驗外包研究整體解決方案_英瀚斯生物。
病理實驗外包,病理染色HE染色常見問題:Q3:細胞核染色過淺,顏色暗淡答:切片在蘇木素染液中停留過短,或蘇木素過度氧化失效,或分化時間太長。對策:重新染色。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉、0.5%氨水、飽和的碳酸氫鈉溶液、乙醇溶液,每個3-5min即可,接著重新染色??梢赃m當(dāng)?shù)亟M織的嗜堿性以增強核染色,如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h,自來水沖洗5-10min染色,或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h,自來水沖洗10min染色。Q4:細胞核染色過深,胞漿著藍色答:切片在蘇木素染液中停留過長;或切片太厚;或分化時間太短。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細胞核),要么重新染色,要么重新制片。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。病理實驗外包檢測,經(jīng)驗豐富,操作熟練。陜西哪家做病理實驗外包
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病理實驗外包,病理染色骨組織的處理方式:組織里存有鈣鹽可妨礙用常規(guī)方法制作良好切片。骨組織及鈣化病灶,經(jīng)過固定后,需要先將鈣鹽除去使組織軟化,才能進行常規(guī)切片。如果脫鈣不全,則切片容易撕開或碎裂,損傷切片刀刀刃。脫去鈣鹽的過程,稱為脫鈣。骨組織固定24小時后,鋸下不超過0.5cm厚的薄骨片,以4%甲醛溶液固定后,進行脫鈣。骨組織過厚則需延長脫鈣時間,但長時間浸于強酸會影響切片染色效果。取材骨組織固定于10%甲醛溶液24小時后再鋸取厚度約0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脫鈣將組織置于脫鈣劑中,每日更換新鮮液,直至組織軟化為止除酸流水沖洗24小時脫水、浸蠟、切片進行常規(guī)脫水、透明、浸蠟、切片南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。陜西哪家做病理實驗外包